تخلیص و جداسازی آنزیم بتالاکتاماز ESBL کلبسیلا پنومونیه و تاثیر اسانس آویشن دنایی بر بیان آن با روش Real Time PCR – SDS PAGE
کد مقاله : 1307-5VBS
نویسندگان
کیومرث امینی1، سینا سلاجقه *2، پرستو رحیمی3، علیرضا حلاجی3
1دانشیار گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم پایه، واحد ساوه، دانشگاه آزاد اسلامی، ساوه، ایران
2دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات، باشگاه پژوهشگران جوان و نخبگان، تهران، ایران
3دانشجو دکتری عمومی دامپزشکی، دانشکده علوم تخصصی دامپزشکی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران
چکیده مقاله
کلبسیلاپنومونیه باعث عفونت‌های ادراری در انسان و ورم پستان در دام‌ها می‌شود. با فراوانی مقاومت آنتی‌بیوتیکی، شمار مرگ و میر با این عفونت‌ها رو به افزایش است و خطر ایجاد سویه‌های بسیار مقاوم که به ‏هیچ آنتی‌بیوتیکی پاسخ نمی‌دهند. مواد موثره آویشن دنایی از سرشاخه‌های گل‌دار و برگ‌های خشک‌شده گیاه به بدست می‌آید. دم‌کرده و جوشانده این گیاه به عنوان مطبوع‌کننده، طعم‌دهنده، ضد‌سرفه، ضد‌اسپاسم، خلط‌آور، ضد‌نفخ، ضد‌میکروب و ضد‌قارچ استفاده می‌شود. در چندین مطالعه خاصیت ضد‌میکروبی آن بر علیه کاندیدا‌آلبیکنس، لیستریا‌مونوسایتوژنز، کمپیلوباکتر، استافیلوکوکوس‌آرئوس، اشرشیاکلی، سودوموناس‌آئروژینوزا و کلبسیلا به اثبات رسیده است. هدف از انجام این مطالعه بررسی اثرات ضد‌باکتری و مکانیسم عمل اسانس آویشن دنایی در برابر بیان ژن بتالاکتاماز SHV در سویه‌های کلبسیلا‌پنومونیه واجد ژن SHV با روش Real-time PCR بود. در این مطالعه، 12 ایزوله کلبسیلاپنومونیه جمع‌آوری شد. پس از آن همه سویه برای ارزیابی وجود ژن بتالاکتاماز SHV توسط روش PCR مورد ارزیابی قرار گرفت. سپس، در شرایط in vitro فعالیت اسانس آویشن دنایی در برابر همه ایزوله‌های واجد ژن SHV با روش میکروبراث دایلوشن بررسی شد. سپس میزان بیان ژن بتالاکتاماز SHV در سویه‌های تیمار شده با اسانس و سویه‌های غیر‌تیمار شده کلبسیلا پنومونیه با روشReal Time PCR و SDS-PAGE مورد ارزیابی قرار‌گرفت. نتایج نشان داد که 2 ایزوله (16%) دارای ژن بتالاکتاماز SHV بودند. بیان ژن SHV در سویه‌های کلبسیلا‌پنومونیه واجد ژن SHV تیمار‌شده با اسانس نسبت به سویه غیرتیمار شده پایین‌تر بود. اسانس آویشن دنایی فعالیت ضد‌بتالاکتامازی قوی در برابر سویه‌های کلبسیلا‌پنومونیه واجد ژن SHV نشان داد.
کلیدواژه ها
آویشن دنایی، کلبسیلاپنومونیه، ژن SHV، Real-time-PCR
وضعیت: پذیرفته شده