| طراحی و ساخت ناقل نوترکیب CRISPR ژن NESTIN درگیر در سرطان گلیوبلاستوما |
| کد مقاله : 1296-5VBS |
| نویسندگان |
|
آزاده ثمره غلامی *1، رضوان امیر شمسی2، حسینعلی ساسان2، هادی روان3، سارا سلطانیان3 1بخش زیست شناسی- دانشکده علوم- دانشگاه شهید با هنر کرمان 2گروه زیست زیست شناسی- دانشکده علوم- دانشگاه شهید با هنر کرمان 3گروه زیست شناسی- دانشکده علوم - دانشگاه شهید با هنر کرمان |
| چکیده مقاله |
| چکیده Nestin یک ژن پروتوآنکوژن است که میزان آن در سرطان گلیوبلاستوما افزایش می یابد. این ژن ، بر روی کروموزوم شماره 1 قرار گرفته است. Nestin در مغز و دیگر اندام های بدن بیان می شود، اما بیان آن در مغز و به خصوص تومورهای گلیوبلاستوما افزایش می یابد. سیستم CRISPR یک تکنولوژی قدرتمند ویرایش ژنوم است که انواع تغییرات در سطح ژنوم شامل اصلاح، روشن و خاموش کردن ژن را با هدف ایجاد انواع مدلهای سلولی، حیوانی ، دارویی و ژن درمانی امکان پذیر ساخته است. هدف از انجام پروژه ایجاد تغییرات حذفی در پروموترآنکوژن NES گلیوبلاستوما با استفاده از سیستم کریسپیر بود. الیگونوکلئوتیدهای طراحی شده با استفاده از سایت Chop Chop پس از دورشته ای شدن و اتصال، به وکتور خطی شده کریسپر به سلول های میزبان E.coliDH5α با روش شوک حرارتی منتقل شدند. نتایج ساخت قطعه راهنما و همسانه سازی با استفاده از ژل الکتروفورز و آزمایش PCR بررسی شدند. آنالیز ژل الکتروفورز، تشکیل حالت دورشتهای gRNA و آزمایش PCR، همسانه سازی موفقیتآمیز آنکوژن Nes را در ناقل بیانی کریسپر ثابت کرد. با ساخت ناقل نوترکیب CRISPR ایجاد تغییرات اصلاحی دقیق در ژنوم با اهدافی از جمله تخریب آنکوژن ها و ژن درمانی امکان پذیر می گردد. کلمات کلیدی: CRISPR ، سرطان، آنکوژن، Nestin |
| کلیدواژه ها |
| کلمات کلیدی: CRISPR ، سرطان، آنکوژن، Nestin |
| وضعیت: پذیرفته شده |