| طراحی وساخت ناقل نوترکیب CRISPR ژن BMI1 درسرطان پستان |
| کد مقاله : 1266-5VBS |
| نویسندگان |
|
حسینعلی ساسان *1، هدیه صمدی2، هادی روان3، سارا سلطانیان3 1دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده علوم- بخش زیست شناسی 2کلمات کلیدی: جهش،کریسپر،BMI-1 ، سرطان پستان 3گروه زیست شناسی- دانشکده علوم - دانشگاه شهید با هنر کرمان |
| چکیده مقاله |
| چکیده BMI-1 یک انکوژن است که تغییر در عملکرد آن باعث بروز سرطان های مختلف از جمله سرطان پستان می شود. این ژن برروی کروموزوم شماره 10 قرارگرفته است. ژن فوق در سرطانهای مختلف از جمله سینه ، معده، تخمدان، سر وگردن، پانکراس و ریه بیان بیش از حد از خود نشان می دهد. سیستم CRISPR یک تکنولوژی قدرتمند ویرایش ژنوم است که انواع تغییرات در سطح ژنوم شامل اصلاح، روشن و خاموش کردن ژن را با هدف ایجاد انواع مدلهای سلولی، حیوانی، دارویی و ژن درمانی امکان پذیر ساخته است. هدف از انجام این پروژه ایجاد تغییرات حذفی در ابتدای پروموتور انکوژن BMI-1با استفاده از سیستم کریسپربود. الیگونوکلئوتیدها بااستفاده از سایت Crispr gRNA Design Tool طراحی وپس از دورشته ای شدن و اتصال به وکتور خطی کریسپر به سلولهای باکتری میزبان E.coliDH5α منتقل شدند. نتایج یافته ها با استفاده از ژل الکتروفورز و آزمایش PCR بررسی شدند.آنالیز ژل الکتروفورز،تشکیل gRNA دورشته ای وآزمایش PCR، کلونینگ موفق انکوژن BMI-1 را در ناقل بیانی کریسپر ثابت کرد. با ساخت ناقل نوترکیب CRISPR ایجاد تغییرات اصلاحی دقیق در ژنوم با اهدافی ازجمله تخریب آنکوژن ها و ژن درمانی امکان پذیر می گردد. |
| کلیدواژه ها |
| کلمات کلیدی: جهش،کریسپر،BMI-1 ، سرطان پستان |
| وضعیت: پذیرفته شده |