| طراحی و ساخت ناقل نوترکیب CRISPR ژن WNT2 سرطان معده |
| کد مقاله : 1265-5VBS |
| نویسندگان |
|
حسینعلی ساسان *1، مجتبی قانع عزآبادی2، هادی روان3، سارا سلطانیان3 1دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده علوم- بخش زیست شناسی 2گروه زیست شناسی- دانشکده علوم- دانشگاه شهید باهنر کرمان 3گروه زیست شناسی- دانشکده علوم - دانشگاه شهید با هنر کرمان |
| چکیده مقاله |
| چکیده WNT2 یک ژن پروتوآنکوژن است که تغییر در عملکرد آن باعث بروز سرطان معده می شود. این ژن بر روی کروموزوم شماره 7 با تعداد 5 اگزون قرار گرفته است. مسیر Wnt2 عادی علاوه بر نقش در جنین زایی اولیه ، اثر مهمی در تنظیم تکثیر ، نگهداری سلول های بنیادی و هموستاز در مخاط طبیعی معده دارد. مشخص شده است که اختلال در تنظیم مسیر Wnt2 در رشد سرطان انسان نقش اساسی دارد. در بیش از 30٪ از سرطان های معده سیگنالینگ Wnt2 / β-catenin به صورت فعال دیده شده است. سیستم CRISPR یک تکنولوژی قدرتمند ویرایش ژنوم است که انواع تغییرات در سطح ژنوم شامل اصلاح، روشن و خاموش کردن ژن را با هدف ایجاد انواع مدلهای سلولی، حیوانی ، دارویی و ژن درمانی امکان پذیر ساخته است. هدف از انجام پروژه ایجاد تغییرات حذفی در ابتدای پروموتر آنکوژن WNT2 وغیرفعال سازی آن با استفاده از سیستم کریسپر بود. الیگونوکلئوتیدهای طراحی شده با استفاده از سایت Chop Chop پس از دورشته ای شدن و اتصال به وکتور خطی شده کریسپر به سلول های میزبان E.coliDH5α منتقل شدند. نتایج یافته ها با استفاده از ژل الکتروفورز و آزمایش PCR بررسی شدند. آنالیز ژل الکتروفورز، تشکیل حالت دورشته ای gRNA و آزمایش PCR، همسانه سازی موفقیت آمیز آنکوژن WNT2را در ناقل بیانی کریسپر ثابت کرد. با ساخت ناقل نوترکیب Crispr ایجاد تغییرات اصلاحی دقیق در ژنوم با اهدافی از جمله تخریب آنکوژن ها و ژن درمانی امکان پذیر می گردد. |
| کلیدواژه ها |
| کلمات کلیدی: جهش، کریسپر،WNT2 ، سرطان، معده |
| وضعیت: پذیرفته شده |